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针对水溶性不对称荧光染料及副产物不同的电荷特性,采用DEAE-52阴离子交换色谱结合葡聚糖凝胶色谱对其进行分离纯化,并以纯化后的染料作为荧光探针对抗体进行标记。结果表明,当使用含0.5moULNa2SO4的0.2moL/LPBS缓冲液(pH7.4)进行洗脱时,DEAE-52阴离子交换色谱能够将目标染料分离,得到纯度为98.4%的产物,得率57.1%。产物经活化后用于标记抗体,标记度达到4.6,与同类别的CF^TM 647相当,达到了实用的要求。