克隆人Toll样受体9基因和转染真核细胞对CpG的反应

来源 :中国老年学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lewisgw

【摘要】

：

目的克隆人Toll样受体9(TLR9)基因,重组入真核表达载体,转染真核细胞,检测对CpG的反应。方法利用逆转录PCR从人外周血mRNA扩增TLR9基因;TLR9基因定向重组入真核表达载体pcDNA

【作者】

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郑斌刘涛郑永晨李佳睿

【机构】

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吉林大学第二医院眼科,吉林大学第二医院中心实验室,吉林大学第一医院

【出处】

：

中国老年学杂志

【发表日期】

：

2014年20期

【关键词】

：

TOLL样受体9 基因重组真核细胞 CPG

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目的克隆人Toll样受体9(TLR9)基因,重组入真核表达载体,转染真核细胞,检测对CpG的反应。方法利用逆转录PCR从人外周血mRNA扩增TLR9基因;TLR9基因定向重组入真核表达载体pcDNA3.0;利用磷酸钙转染方法导入肝癌细胞系SMMC7721,经G418培养筛选,克隆出携有人TLR9 CDNA的细胞系;用不同的CpG刺激转染的细胞系观察生长率。结果逆转录PCR扩增出3.0 kb的DNA片段,经TA克隆和细胞DNA序列分析为人TLR9基因全序列;利用定向克隆的方法将人TLR9基因成功重组入pcD

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