【摘 要】
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目的探讨去甲基化药物地西他滨对急性T淋巴细胞白血病细胞株Molt4细胞的影响及其可能的作用机制。方法CCK-8法检测地西他滨对细胞增殖的影响；Annexin Ⅴ/PI双重染色法检测地西他滨对细胞凋亡的影响；PI染色法检测细胞周期变化；转录组高通量测序筛选组间差异基因；亚硫酸氢盐测序法检测地西他滨作用Molt4细胞前后乳铁蛋白（LTF）基因启动子CpG岛的甲基化水平变化；实时定量RT-PCR及Wes
【机 构】
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200433 上海，第二军医大学附属长海医院血液科,200433 上海，第二军医大学附属长海医院血液科,200433 上海，第二军医大学附属长海医院血液科,200433 上海，第二军医大学附属长海医院
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目的探讨去甲基化药物地西他滨对急性T淋巴细胞白血病细胞株Molt4细胞的影响及其可能的作用机制。
方法CCK-8法检测地西他滨对细胞增殖的影响；Annexin Ⅴ/PI双重染色法检测地西他滨对细胞凋亡的影响；PI染色法检测细胞周期变化；转录组高通量测序筛选组间差异基因；亚硫酸氢盐测序法检测地西他滨作用Molt4细胞前后乳铁蛋白（LTF）基因启动子CpG岛的甲基化水平变化；实时定量RT-PCR及Western blot法分别检测LTF mRNA及蛋白的表达变化。
结果地西他滨能有效抑制Molt4细胞的增殖，抑制率呈时间和剂量依赖性增加，并能诱导细胞凋亡，使细胞阻滞于G0/G1期。0.50 μmol/L地西他滨处理72 h后，Molt4细胞LTF基因启动子甲基化率较对照组降低（45.0%对72.3%），差异有统计学意义（P<0.05），mRNA和蛋白表达增加（P值均<0.05），同时还检测到caspase 3、caspase 9凋亡蛋白表达增加（P值均<0.05）。
结论地西他滨诱导Molt4细胞凋亡，阻滞细胞周期在G0/G1期，抑制细胞增殖。LTF基因是地西他滨作用的重要靶点。
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