【摘 要】
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在E.coli BL21(DE3)中过量表达D-乳酸脱氢酶基因(D-ldh),并优化该重组菌全细胞转化苯丙酮酸钠合成苯基乳酸的条件。通过单因素实验和正交实验优化诱导表达条件,并在此基础上对全
【机 构】
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苏州大学基础医学与生物科学学院,常熟理工学院苏州市食品生物技术重点实验室发酵工程技术研究中心
【基金项目】
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科技部农业科技成果转化资金项目(2013GB2C100176), 江苏省自然科学青年基金项目(BK20130380), 江苏省高校自然科学研究项目(13KJB550002), 江苏省“六大高峰人才”资助计划项目(NY-021), 苏州市科技支撑计划(SNG201354), 常熟市科技发展计划(CN201220)
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在E.coli BL21(DE3)中过量表达D-乳酸脱氢酶基因(D-ldh),并优化该重组菌全细胞转化苯丙酮酸钠合成苯基乳酸的条件。通过单因素实验和正交实验优化诱导表达条件,并在此基础上对全细胞转化苯丙酮酸钠合成苯基乳酸进行了优化。结果表明,菌体OD600为1.2时添加IPTG至终浓度0.2mmol/L,25℃诱导4h后收集菌体具有最佳转化活性;最优分批转化条件:pH7.0,8.0g/L苯丙酮酸钠,20g/L葡萄糖,1%(v/v)吐温-80,菌体浓度20g/L(干重),37℃,转速200r/min转化0.
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