【摘 要】
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为了研究鸡潜在转化生长因子结合蛋白(LTBP1)功能,构建原核表达重组质粒pET-30a-LTBP1,转化E.coli BL21感受态细胞并经IPTG诱导进行表达。对以包涵体形式表达的LTBP1蛋白进行
【机 构】
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河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,北京中医药大学东方医院,河南科技大学动物科技学院/动物疫病与公共卫生重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(U1604232),中原英才计划-中原基础研究领军人才项目(2019—2020),河南省重点研发与推广专项(科技攻关)(192102110072),河南省农业科学院杰出青年科技基金项目(2019JQ01)
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为了研究鸡潜在转化生长因子结合蛋白(LTBP1)功能,构建原核表达重组质粒pET-30a-LTBP1,转化E.coli BL21感受态细胞并经IPTG诱导进行表达。对以包涵体形式表达的LTBP1蛋白进行变复性和亲和层析纯化,然后免疫Balb/C小鼠,利用细胞融合技术建立单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备抗鸡LTBP1的单克隆抗体。通过间接酶联免疫吸附试验(iELISA)筛选,获得了2株杂交瘤细胞株3C11-A9和2B1-G7。以效价较高的3C11-A9制备单克隆抗体腹水,间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白免疫印迹
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