J亚群禽白血病病毒gp85蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

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制备J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85蛋白单克隆抗体,采用本实验室表达的ALV-J gp85蛋白作为免疫原,按照常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,利用获得的杂交瘤细胞制备腹水,用辛酸-硫酸铵沉淀法对腹水进行纯化。结果获得了5株杂交瘤细胞:1B9、1G4、3A1、3D12、5G5。杂交瘤细胞上清抗体效价均在27以上,腹水抗体效价均在29以上。Western blot和间接免疫荧光试验表明,单克隆抗体可以与ALV-J gp85蛋白发生特异性反应。本研究制备的单克隆抗体为ALV-J抗原诊断试剂盒的开发奠定了基础。
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