目的制备不同质量比的丝素蛋白复合胶原蛋白支架,分析其综合性能,优选软骨组织工程支架材料。方法按丝素蛋白∶胶原蛋白不同质量比,采用真空冷冻干燥法制备3种复合支架,分别为4∶2(A组)、4∶4(B组)和4∶8(C组);检测每组复合支架的孔隙率、吸水膨胀率、力学性能及孔径。采用密度梯度离心法分离培养4周龄雄性Wistar大鼠BMSCs,取第3代BMSCs接种于各组复合支架,培养1、3、5、7、9、11、13 d,MTT检测支架内细胞增殖情况;培养14 d采用HE染色和扫描电镜观察细胞在支架内部增殖、分布情况。结果 A、B、C组支架孔隙率分别为94.6%±1.6%、80.6%±1.1%、60.6%±1.0%,A组显著高于B、C组,B组高于C组(P<0.05)。吸水膨胀率分别为1 523.7%±186.6%、1 091.0%±151.6%、659.6%±161.4%,A组显著高于B、C组,但组间比较差异无统计学意义(F=6.67,P=0.08);各组支架均具有较好的黏弹性,A、B、C组弹性模量分别为(23.1±2.5)、(25.1±2.3)、(29.8±2.6)kPa,组间比较差异无统计学意义(F=2.00,P=0.28),符合关节软骨弹性模量值(4~35 kPa);A、B、C组支架孔径分别为(103±12)、(80±15)、(60±16)μm,3组间比较差异无统计学意义(F=2.22,P=0.26)。MTT检测示,7、9、11、13 d时A组细胞增殖高于B、C组(P<0.05)。培养14 d,扫描电镜观察示A组支架孔径大小较一致,相通性好,细胞在支架内部生长良好,伸展充分,基质分泌多;B、C组支架孔径较小,孔隙间相通性差,细胞在内部生长较差;HE染色和扫描电镜示支架内部A组细胞数量明显多于B、C组。结论以丝素蛋白∶胶原蛋白质量比为4∶2制备复合支架具有合适的孔隙率、吸水膨胀率、弹性模量和孔径,细胞在支架内部增殖更好,是软骨组织工程的理想支架材料。