【摘 要】
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目的:探讨驱动蛋白超家族成员4A(kinesin family member 4A,KIF4A)与卵巢癌患者预后的关系,对卵巢癌细胞生物学功能的影响,以及功能富集分析.方法:利用TCGA(the cancer genom
【机 构】
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215000 江苏 苏州,苏州大学附属第二医院 妇产科;215000 江苏苏州,苏州大学 骨科研究所
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目的:探讨驱动蛋白超家族成员4A(kinesin family member 4A,KIF4A)与卵巢癌患者预后的关系,对卵巢癌细胞生物学功能的影响,以及功能富集分析.方法:利用TCGA(the cancer genome atlas,TCGA)数据库中372例卵巢癌患者数据进行KIF4A基因与相关共表达基因的富集分析及Kaplan-Meier法预后分析.采用实时荧光定量PCR法(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)及Western blot检测多种卵巢癌细胞系中KIF4A的表达量.将三组KIF4A-shRNA分别转染至KIF4A相对表达量最高的细胞系.采用RT-qPCR及Western blot检测转染效果,选取沉默效率最高的建立稳定沉默细胞.采用MTT实验、克隆形成实验检测细胞增殖情况,划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期分布.结果:KIF4A基因在卵巢癌临床样本中显著高表达(P<0.05),且KIF4A高表达组总生存期显著低于低表达组(P<0.01).不同卵巢癌细胞株中的表达水平均高于正常人卵巢上皮细胞株IOSE80(P<0.05),其中在SKOV3中表达最高.沉默KIF4A的表达能有效抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移能力(P<0.05),并促进卵巢癌细胞凋亡(P<0.05),并主要影响G0/G1期.基因富集分析显示KIF4A与MYH11、ACTG2、HSPB6等基因成负相关,与BUB1、CCNA2、MELK等基因呈正相关.同时,KIF4A在卵巢癌中与有丝细胞核分裂等功能功能相关,并且可影响细胞周期等相关通路.结论:沉默KIF4A基因可抑制卵巢癌细胞的增殖,迁移能力并促进其细胞凋亡,影响其细胞周期,该基因有望成为卵巢癌治疗的新靶点.
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