邻苯二甲酸二丁酯对F1代测交斑马鱼原始生殖细胞迁移和精巢毒性研究

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目的研究邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate, DBP)诱导雄性生殖功能异常的传代效应。方法对4~5月龄的成年雄性斑马鱼进行连续30 d的DBP的暴露实验,分别设置空白对照组,溶剂(丙酮0.01%)对照组,0.2、0.6和1.8 mg/L DBP暴露组;暴露后的雄性斑马鱼定义为F0代。各组随机选择20条F0代雄鱼与野生型雌性斑马鱼交配产卵(称F1代测交胚胎)进行实验。F1代受精后6、24、48和72 h(hour post fertilization, hpf),用显微镜观察F1代测交胚胎发育形态改变,测定24hpf自主运动次数和72hpf心率。采用胚胎整体原位杂交技术标记原始生殖细胞(Primordial germ cells, PGCs)迁移;组织病理学检测F1代测交成年斑马鱼精巢特征。结果成年F1代测交雄性斑马鱼精巢发育及功能被抑制,同时存在间质(Leydig)细胞增生与精子数量减少的病理损害特征。DBP(0.6和1.8 mg/L剂量组)暴露后F1代出现小头小眼畸形、弱色素沉着、心包及卵黄囊水肿和脊椎异常等;24hpf自主运动(抽动)减弱,且随DBP浓度增加呈现明显的剂量-效应关系(R~2=0.8929,P<0.05);72hpf心率随着DBP暴露浓度增加逐渐降低,呈现明显的剂量-效应关系(R~2=0.8999,P<0.05)。胚胎整体原位杂交结果显示, 1.8 mg/L DBP暴露组的F1代测交斑马鱼发育至24hpf时,PGCs分布异常,部分PGCs没有迁移到生殖脊部位。结论 DBP暴露导致成年雄性斑马鱼的生殖异常和胚胎的发育异常可以传递至F1代,可能通过PGCs的迁移异常干扰生殖发育。
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