【摘 要】
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目的克隆、表达沙眼衣原体多形外膜蛋白I（PmpI）基因，并进行免疫原性鉴定，分析其生物学特征。方法用生物信息软件分析沙眼衣原体多形外膜蛋白PmpI的基因序列并预测PmpI蛋白的B细胞抗原表位。以D型沙眼衣原体DNA为模板，PCR扩增PmpI基因N端90 ~ 1464碱基序列，构建原核载体进行诱导表达。Ni离子亲合层析柱纯化重组蛋白，制备PmpI多克隆抗体并用Western印迹法检测其免疫原性。结果
【机 构】
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300052 天津医科大学总医院皮肤性病科,300052 天津医科大学总医院皮肤性病科,300052 天津医科大学总医院皮肤性病科,300052 天津医科大学总医院皮肤性病科,300052 天津医科大
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目的克隆、表达沙眼衣原体多形外膜蛋白I（PmpI）基因，并进行免疫原性鉴定，分析其生物学特征。
方法用生物信息软件分析沙眼衣原体多形外膜蛋白PmpI的基因序列并预测PmpI蛋白的B细胞抗原表位。以D型沙眼衣原体DNA为模板，PCR扩增PmpI基因N端90 ~ 1464碱基序列，构建原核载体进行诱导表达。Ni离子亲合层析柱纯化重组蛋白，制备PmpI多克隆抗体并用Western印迹法检测其免疫原性。
结果对蛋白质的二级结构和柔性区、氨基酸的亲水性、抗原指数和表面可及性预测结果综合分析，推测该蛋白含有8个优势B细胞表位。PCR扩增D型沙眼衣原体PmpI基因核苷酸序列长度为1 375 bp。成功构建pET28a-PmpI原核表达重组体，经诱导表达、亲和层析纯化后获得了相对分子质量为50 000的重组蛋白并制备其多克隆抗体。
结论成功克隆并表达了D型沙眼衣原体多形外膜蛋白N-PmpI，为研究该蛋白的生物学功能奠定了一定基础。
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