【摘 要】
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目的构建TIEG基因siRNA慢病毒载体。方法针对已经筛选确定的TIEG基因siRNA有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA退火形成双链DNA与经BamH I和EcoRI酶切后的PshRNAcopGFP—lentive
【基金项目】
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国家自然科学基金(No:30470812)
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目的构建TIEG基因siRNA慢病毒载体。方法针对已经筛选确定的TIEG基因siRNA有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA退火形成双链DNA与经BamH I和EcoRI酶切后的PshRNAcopGFP—lentivector慢病毒载体[含H1启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生psiRNA—TIEG慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,用psiRNA—TIEG和病毒包装系统共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度;用包装病毒颗粒注射大鼠,通过
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