抗人组织金属蛋白酶抑制剂1的核酶高表达载体的构建及体外活性鉴定

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：netbase

【摘要】

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目的：构建特异性切割人组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinasesl，TIMP-1)的锤头状核酶的真核表达载体并在体外进行活性鉴定，为应用于瘢痕基因治疗奠定基

【作者】

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汪滋民吴建明林子豪江华袁湘斌赵耀忠金由辛

【机构】

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第二军医大学长征医院整形外科,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所、分子生物学国家重点实验室

【出处】

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第二军医大学学报

【发表日期】

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2004年1期

【关键词】

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人组织金属蛋白酶抑制剂1 核酶载体体外活性鉴定基因表达 tissue inhibitor of metalloproteinases 1 ribozym

【基金项目】

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This work is supported by the National Natu-ral Science Foundation of China( 3 9970 761) and Major Direction ofChinese Academy of Sciences( KSCX2 -2 -0 4)

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目的：构建特异性切割人组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinasesl，TIMP-1)的锤头状核酶的真核表达载体并在体外进行活性鉴定，为应用于瘢痕基因治疗奠定基础。方法：设计并合成针对人组织TIMP-1 mRNA的锤头状核酶基因Rz182、Rz358和Rz412及相应的点突变核酶基因，将核酶基因克隆于可在体内高表达核酶的载体pBSKneoU6中，制备嵌合于U6 snRNA分子的核酶基因克隆。逆转录聚合酶链式反应获得全长TIMP-1 mRNA基因片段并克

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