论文部分内容阅读
目的
探讨钙调蛋白(CaM)抑制剂N-(6-氨基己基)-5-氯-1-萘磺酰胺(W-7)通过逆转上皮-间充质转化(EMT)抑制胶质母细胞瘤(GBM)细胞侵袭、迁移能力。
方法细胞计数试剂盒(CCK-8)检测W-7对U87、U251胶质瘤细胞存活率的影响。Transwell侵袭实验检测对照组和W-7处理组穿过小室底膜的U87、U251细胞数目。划痕愈合实验检测各组U87、U251细胞相对迁移距离。Western blot法检测各组U87、U251细胞中上皮标志物(E-钙黏蛋白)和间质标志物(N-钙黏蛋白、波形蛋白)以及转录因子(ZEB1蛋白)的相对表达水平。倒置显微镜下观察各组U87、U251细胞形态变化。免疫荧光检测各组胶质瘤细胞N-cadherin的表达差异。
结果W-7处理组穿过小室底膜的U87、U251细胞数少于对照组(P＝0.001)；W-7处理组U87、U251细胞愈合速率低于对照组，24 h后差异均有统计学意义(P＝0.001、0.006)。W-7处理组中U87、U251细胞E-钙黏蛋白的相对表达水平高于对照组(P＝0.001)，而N-钙黏蛋白、ZEB1、波形蛋白相对表达水平低于对照组(P＝0.001)。与对照组比较，W-7处理组U87、U251细胞形态呈椭圆形、圆形改变，细胞迁移能力减弱。
结论CaM抑制剂W-7能够通过逆转EMT抑制GBM细胞的侵袭、迁移能力。