【摘 要】
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离子注入技术是20世纪80年代兴起的一种综合诱变技术,其应用于生物工程已取得了丰硕成果,但在霉酚酸产生菌的诱变育种中的应用还未见报道.短密青霉菌(Penicillium brevicompa
【机 构】
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北京化工大学生命科学与技术学院,华北制药集团新药研究开发中心国家微生物药物工程研究中心
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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离子注入技术是20世纪80年代兴起的一种综合诱变技术,其应用于生物工程已取得了丰硕成果,但在霉酚酸产生菌的诱变育种中的应用还未见报道.短密青霉菌(Penicillium brevicompactum)M-51是从土壤中分离得到的MPA产生菌F-663经过紫外线、微波等诱变处理得到的.为获得霉酚酸的高产工业菌株,进一步对该菌株进行了离子注入诱变处理.用15keV氮离子分5个剂量进行处理,结果显示,随离子注入剂量增加,存活率呈现较明显的下降-上升-下降的"马鞍型"变化趋势.在剂量为140×2.6×1013ions/cm2时,菌株变异率及正变率均最高,分别达到88.9%和63.4%.用HPLC定量测定发酵液中霉酚酸的含量,筛选到产霉酚酸能力提高30.1%的突变株M-163.经过连续传代试验,其遗传性状稳定.对发酵条件的优化结果显示最佳种龄为24h;用正交试验方法对发酵培养基中的碳、氮源进行优化,得到较优配方.突变株M-163在最优发酵条件下,霉酚酸摇瓶发酵单位可达2819μg/mL.野生菌株F-663的MPA产量为133ug/mL,经过5代诱变育种及发酵条件优化,产量提高了20.2倍.
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