端粒酶逆转录酶在五羟色胺诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖过程中的作用

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目的 研究端粒酶逆转录酶(TERT)在五羟色胺(5-HT)诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖过程中的作用.方法 组织块法培养大鼠PASMCs.大鼠PASMCs增殖实验分别检测5-HT和反义TERT寡核苷酸对大鼠PASMCs增殖的影响.激光共聚焦显微镜检测异硫氰酸荧光素(FITC)标记的反义TERT寡核苷酸,明确反义TERT寡核苷酸在PASMCs中的分布.原位杂交实验和免疫组化实验检测反义TERT寡核苷酸和5-HT对PASMCs中TERT的mRNA和蛋白表达的影响.结果 5-HT诱导大鼠PASMCs增殖实验证实5-HT在10-9~10-5mol/L的剂量范围内,5-HT对大鼠PASMCs的促增殖作用具有剂量依赖性.原位杂交实验和免疫组化实验证实5-HT可能直接或间接促进TERT的mRNA和蛋白表达.FITC标记的反义TERT寡核苷酸在激光共聚焦显微镜下显示,反义TERT寡核苷酸主要分布于PASMCs胞质.反义TERT寡核苷酸对大鼠PASMCs增殖抑制实验证实反义TERT寡核苷酸可以抑制5-HT诱导的大鼠PASMCs增殖,而正义TERT寡核苷酸对5-HT诱导的大鼠PASMCs增殖没有作用.原位杂交实验和免疫组化实验证实反义TERT寡核苷酸可以抑制5-HT引起的TERT的mRNA和蛋白表达增强.结论 研究结果提示,TERT在5-HT诱导的PASMCs增殖过程中发挥重要作用,通过反义技术抑制TERT表达为肺动脉高压的基因治疗提供了理论基础。

其他文献
目的 了解维生素D受体基因Fok Ⅰ多态性在蒙古族人群中的分布. 方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,分析506 名内蒙古地区蒙古族人的维生素D受体Fok Ⅰ基因座的基因型和等位基因的分布频率.结果维生素D受体基因型FF、Ff、ff在本研究人群的分布频率分别为31%、52%和17%.等位基因F占57%,f占43%.基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律.结论中国蒙古族人