【摘 要】
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为了快速检测针对传染性支气管炎病毒(IBV)抗体,本研究建立相应的间接ELISA(iELISA)检测方法.以本实验室分离的临床毒株DS10为检测抗原,经过差速离心纯化获得DS10病毒作为包
【机 构】
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湖南农业大学,湖南长沙410128江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014;湖南农业大学,湖南长
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为了快速检测针对传染性支气管炎病毒(IBV)抗体,本研究建立相应的间接ELISA(iELISA)检测方法.以本实验室分离的临床毒株DS10为检测抗原,经过差速离心纯化获得DS10病毒作为包被抗原,利用方阵试验,优化一系列条件,最终确定了最佳的ELISA反应条件.抗原最佳包被浓度为0.11 mg/mL,血清最适稀释度为1∶100,封闭液为含1％BSA的PBST,封闭时间为60 min,一抗作用时间90 min,HRP标记的兔抗鸡IgG稀释倍数为1∶3 500,作用时间为60 min,显色时间为10 min.用iELISA方法和血凝抑制试验(HI)同时检测145份血清样品的结果表明,建立的iELlSA方法与常规的HI检测的符合率为92.41％,iELISA和HI的阳性检出率分别为92.41％和90.34％,iELISA的敏感性略优于HI.
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