目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定包头地区蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法,对比包头市固阳县、土默特右旗和达茂旗蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量差别,为更好评价本地区蒙古黄芪品质提供依据。方法色谱柱为Tnature C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长254 nm。结果在10.23~102.3μg/m L范围内,毛蕊异黄酮葡萄糖苷与峰面积呈良好线性关系,r~2=0.9994,平均加标回收率为96.93%~98.73%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.56%~2.27%。结论该方法简单、快速、可重复性好,可用于测定蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,且3个旗县的蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量有差别,其中以土默特右旗所产蒙古黄芪中其含量最高,且生长年限不同的蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量也有差别。本研究为今后内蒙古地区蒙古黄芪的栽培和应用提供科学、可靠的依据。