酒用酸性脲酶的纯化及其N端序列的测定

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采用乙醇分级沉淀、Superdex200凝胶过滤、MonoQ离子交换对Enterobactriasp R-SYB082产酒用酸性脲酶进行了纯化。SDS-PAGE电泳结果表明,该酶已达到电泳纯,纯化倍数为21.1,酶活回收42%。Superdex200凝胶过滤测定其全酶相对分子质量约为430000,SDS-PAGE电泳测定其亚基相对分子质量约为72000,表明该酶为同源六聚体,并利用Edman降解法测定了蛋白质N端序列的8个氨基酸残基序列:S-F-K-M-D-R-K-Q。酶反应的最适pH为4.5,最适温度为
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