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采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增HBVX基因,定向亚克隆入真核表达载体pRc/CMV2.构建重组质粒pCMV/X;采用脂质体法转染QSG7701细胞,筛选阳性细胞克隆;RT—PCR法检测HBV XmRNA的表达情况.Western blotting法鉴定HBx蛋白的表达,结果表明,构建的真核重组表达质粒pCMV/X中包含有完整的HBVX基因片断,pCMV/工转染的QSG7701细胞中有HBVXmRNA及HBx蛋白的稳定表达.成功建立了HBVX稳定转染的细胞系,为进一步探讨HBx在HCC的发生发展过程中所