谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建

来源 :华东理工大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：windwebsystem

【摘要】

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通过PCR获得E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因(gshI,gshII)片段,结合定点突变稀有起始密码子,设定gshI与gshII位置与距离,构建双顺反子重组表达载体pTrc99A/gshI-gshII,建立GSHI

【作者】

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尧辉魏东芝周宇荀沈立新刘寿春

【机构】

：

华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,DepartmentofVascularBiology

【出处】

：

华东理工大学学报

【发表日期】

：

2002年2期

【关键词】

：

谷胱甘肽合成酶系蛋白表达体系双顺反子重组表达载体协调表达

【基金项目】

：

教育部高等学校重点实验室访问学者基金资助 ;上海市重点学科资助项目 ;上海市生物工程重点学科建设资助项目

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通过PCR获得E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因(gshI,gshII)片段,结合定点突变稀有起始密码子,设定gshI与gshII位置与距离,构建双顺反子重组表达载体pTrc99A/gshI-gshII,建立GSHI、GSH-II蛋白表达体系.结果表明:以0.08mmol/L IPTG于28℃诱导工程菌E.coli BL21(DE3)(pTrc99A/gshI-gshII),GSH-I、GSH-II蛋白比为4.5∶1(m∶m)时谷胱甘肽合成能力最高,达到每克湿菌体8.5mg.通过构建单顺反子重组表达载体

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