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将来源于产琥珀酸丝状杆菌的β-葡聚糖酶基因根据毕赤酵母的偏好性进行密码子优化,通过全基因合成该优化基因(FsGLUm)并构建重组表达载体pPIC9K-FsGLUm。将pPIC9K-FsGLUm分别用SalⅠ和BglⅡ酶切线性化后电击转化入毕赤酵母GS115染色体DNA中,经过表型筛选和抗性筛选获得不同甲醇利用表型Mut^+和Mut^s阳性菌株。经刚果红平板检测,在摇瓶水平下,Mut^+型菌株表达产物产生的水解透明圈明显大于Mut^s型菌株表达产物。在发酵罐水平下,Mut^+型菌株各时间段表达产物酶活性明显