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目的
探讨侵袭性肺曲霉菌病(IPA)感染早期特异性T细胞免疫反应的变化及意义。
方法从24例确诊或拟诊的IPA患者(IPA组,包括病理确诊曲霉菌感染6例,临床诊断曲霉菌感染9例,拟诊曲霉菌感染9例)和8例健康志愿者(健康对照组)外周抗凝血中分离出外周血单核细胞(PBMCs),利用烟曲霉加热灭活的孢子(Conidia)作为抗原,刺激PBMCs产生烟曲霉特异性T细胞。应用酶联免疫斑点测定法(ELISPOT)检测干扰素γ(IFN-γ)的分泌情况,并用流式细胞仪分析早期细胞免疫过程中T细胞表型的变化。
结果在IPA组中,ELISPOT的检测结果示病理确诊和临床诊断者IFN-γ阳性率较高(分别为5/6,7/9),而临床拟诊者IFN-γ阳性率较低(3/9)。IPA组IFN-γ阳性率[62.5%(15/24)]高于健康对照组[0(0/8)],差异有统计学意义(P<0.05)。IPA组CD4+ T和CD4+ T/CD8+ T均低于健康对照组,差异有统计学意义(0.202 0±0.085 6比0.385 3±0.126 5,1.01±0.34比1.55±0.41)(P<0.05或<0.01),而CD8+ T高于健康对照组,差异有统计学意义(0.298 5±0.069 1比0.257 6±0.102 6)(P<0.05)。
结论Conidia可以诱导机体产生烟曲霉特异性CD4+ T细胞介导的Th1型免疫反应,展示曲霉菌感染时患者的免疫状态,为疾病的诊断和病情评估提供新的思路和方法。