论文部分内容阅读
目的
通过维生素D3结合尼古丁法构建血管钙化动物模型，观察血管钙化过程中的微小RNA(miRNA，miR)谱变化，并通过生物信息学预测分析miRNA靶基因，采用Affemitrix miRNA芯片检测血管钙化模型组和对照组主动脉组织中miRNA表达谱变化(设2倍改变为阈值)，筛选差异表达的miRNAs。
方法7周龄雄性SD大鼠30只，随机分为两组，每组15只，采用维生素D3(300 kIU/kg)肌肉注射和尼古丁(5 mg/kg)灌胃建立大鼠血管钙化动物模型。对照组给予等体积的生理盐水处理。诱导4周后处死大鼠并分离主动脉组织。提取组织RNA，纯化获得miRNAs，采用Affemitrix miRNA芯片检测血管钙化模型组和对照组主动脉组织中miRNA表达谱变化(设2倍改变为阈值)，筛选差异表达的miRNAs。
结果诱导第20天模型组大鼠血钙水平显著升高(P＝0.000)。碱性磷酸酶(ALP)的检测结果显示，与对照组比较，模型组大鼠ALP活性明显升高，第20天时，模型组大鼠ALP活性增高了85.7%。miRNA芯片结果表明在模型组中，mmu-miR-297a的表达量明显下调。
结论成功构建血管钙化动物模型，通过筛选差异表达的miRNAs，可见mmu-miR-297a在血管钙化模型中表达下调。