荷移光度法测定谷物中嘌呤含量的实验

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探讨荷移光度法测定谷物嘌呤的方法。通过筛选得到适宜测定嘌呤的荷移剂为氯醌酸,并对氯醌酸荷移光度法测定嘌呤的条件做了探究,所得最优测定条件为:室温(20~30℃)、pH中性、以无水乙醇为介质、控制测定体系水分2. 5%~3. 0%、反应5~30 min,得到n氯醌酸∶n鸟嘌呤=1∶3的紫红色稳定荷移络合物;在λmax=532 nm下,鸟嘌呤和混合总嘌呤浓度在0~1×10-4mol·L-1范围内符合朗伯-比耳定律且有良好的线性关系,其线性方程分别为ΔA鸟嘌呤=0. 034c鸟嘌呤+0. 005 (R2=0. 995 2)、ΔA总嘌呤=0. 028 5c总嘌呤+0. 0071 (R2=0. 992),其摩尔吸光系数分别为ε鸟嘌呤=3. 1×104L·mol-1·cm-1、ε总嘌呤=3. 6×104L·mol-1·cm-1,检出限分别为2×10-6mol·L-1、9×10-6mol·L-1。而对谷物实样的测得结果显示本实验所建立方法有良好的精密度(RSD 2. 2%~7. 3%)且与HPLC法(RSD 2. 2%~7. 5%)相一致,回收率为83. 8%~98. 1%与HPLC法的91. 8%相当,符合GB/T 27417—2017对微量成分分析的要求,且经F-检验和t-检验均表明本法与HPLC法无统计学上差异。因此,用氯醌酸荷移光度法测定谷物中的嘌呤含量可行。
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