重组人附睾特异表达蛋白ESC42及其生物学鉴定

来源 :中华男科学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aig2008
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目的:利用基因工程技术合成出人附睾特异表达基因ESC42重组蛋白,为其功能研究提供材料.方法:从人附睾cDNA文库扩增出ESC42基因片段,构建原核表达载体,进行克隆、表达、蛋白质纯化及单克隆抗体制备;Western印迹鉴定纯化产物及其单克隆抗体的特异性;基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定ESC42蛋白相对分子质量(Mr)和肽质量指纹,用MS-Fit软件查询NCBI数据库.结果:获得rhESC42融合蛋白纯度为99%;Mr为11978.12,制备出抗rhESC42单克隆抗体
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