【摘 要】
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根据已发表的结核分枝杆菌23S rRNA和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计并合成了2对可扩增结核分枝杆菌和牛分枝杆菌特异性基因片段的引物,建立二重PCR快速检测结核分枝杆菌和牛分
【机 构】
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广西兽医研究所; 广西南宁市动物疾病预防诊断中心; 广西壮族自治区疾病预防控制中心; 广西武宣动物疾病预防诊断中心;
【基金项目】
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新世纪百千万人才工程国家级人选专项基金(945200603);国家农业公益性专项(200803026);广西壮族自治区科技攻关项目(桂科转0626001-5-1),广西壮族自治区科技攻关项目(桂科攻0537008-3C);广西壮族自治区水产畜牧局科研计划(桂鱼牧科[08]283-20)
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根据已发表的结核分枝杆菌23S rRNA和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计并合成了2对可扩增结核分枝杆菌和牛分枝杆菌特异性基因片段的引物,建立二重PCR快速检测结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的方法,并研制出检测试剂盒。结果表明,该检测试剂盒对结核分枝杆菌能特异性地扩增出838 bp条带而扩增不出631 bp条带,牛分枝杆菌能特异地扩增出838 bp和631 bp条带,而对其他牛菌株的DNA扩增结果均为阴性;敏感性试验表明最低能检测出50 pg的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌DNA模板;保存期测定结果表明,在-20℃条件下保存至1、3、6、9个月时,试剂盒的敏感性无明显变化,仍能检测到50 pg的DNA模板,保存至12个月时其敏感度仍能100%检出阳性样品。
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