【摘 要】
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目的 探讨miR-146a对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)增殖和新生血管生成的影响及其机制.方法 选取对数生长期的HRMEC,将细胞分为正常组、高渗组、高糖组、阴性对照组、miR-146a mimics组、miR-146a mimics+IL-17A组.正常组细胞用含5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖的培养基培养24 h,高渗组细胞用含5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖和50 mmol·L-1甘露醇的培养基培养24 h;其余各组细胞先用含30 mmol·L-1 D-葡萄糖的培养基培养2
【机 构】
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332000 江西省九江市,九江市第一人民医院眼科
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目的 探讨miR-146a对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)增殖和新生血管生成的影响及其机制.方法 选取对数生长期的HRMEC,将细胞分为正常组、高渗组、高糖组、阴性对照组、miR-146a mimics组、miR-146a mimics+IL-17A组.正常组细胞用含5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖的培养基培养24 h,高渗组细胞用含5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖和50 mmol·L-1甘露醇的培养基培养24 h;其余各组细胞先用含30 mmol·L-1 D-葡萄糖的培养基培养24 h后,阴性对照组、miR-146a mimics组、miR-146a mimics+IL-17A组分别转染阴性对照序列+pcDNA3.1空质粒、miR-146a mimics质粒、miR-146a mimics+pcDNA3.1-IL-17A质粒.采用MTT法检测细胞活力,细胞划痕实验检测细胞迁移活性,Matrigel法检测细胞管腔形成情况,Western blot法检测相关蛋白表达.结果 与正常组相比,高糖组细胞活力、细胞迁移率和细胞环状结构数量均升高,VEGF、VEGF受体2、白细胞介素-17A、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达亦均升高(均为P<0.05);而miR-146a mimics组上述指标则较高糖组均降低(均为P<0.05);miR-146a mimics+IL-17A组上述指标均高于miR-146a mimics组(均为P<0.05).结论 上调miR-146a表达可有效地降低高糖诱导的HRMEC增殖和新生血管生成,其作用机制可能与降低IL-17A表达进而抑制PI3K/AKT通路激活有关.
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