中华补血草ISSR-PCR体系的构建与正交优化

来源 :南京师大学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：Leechen17008

【摘要】

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为获得中华补血草ISSR的最佳反应体系，采用正交试验设计，对影响ISSR反应的模板含量、Mg^2＋浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行优化筛选．通过各因子的

【作者】

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丁鸽张代臻于延球赵玲玲张蓓蓓

【机构】

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盐城工学院化学与生物工程学院,江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室

【出处】

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南京师大学报(自然科学版)

【发表日期】

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2012年3期

【关键词】

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中华补血草 ISSR 反应体系正交优化 Limonium sinense ISSR reaction system orthogonal optimiz

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为获得中华补血草ISSR的最佳反应体系，采用正交试验设计，对影响ISSR反应的模板含量、Mg^2＋浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行优化筛选．通过各因子的组合研究，分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化，建立了可用于中华补血ISSR—PCR分析的稳定可靠的反应体系：25灿PCR反应体积，10×Buffer2．5μL，2mmol／LMgCl2，dNTP100μmol／L，模板DNA为20ng，Taq聚合酶1．5u，随机引物0．4μmol／L，退火温度52℃-58℃

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