论文部分内容阅读
目的 检测微小RNA(miRNA,miR)-27a在肝癌中的表达,探讨miR-27a在肝癌细胞中的功能和作用机制.方法 采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-27a在肝癌组织中的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖实验检测miR-27a对肝癌细胞的增殖影响,荧光素酶报道载体系统验证miR-27a对Sprouty2(Spry2)基因3非翻译区的作用,Real-time PCR检测miR-27a对Spry2基因mRNA的抑制作用.结果 miR-27a在肝癌组织的表达量(0.62±0.54)比癌旁组织(0.26±0.13)显著上调(P<0.01),而且肝癌肿块越大的患者miR-27a的表达越高(>5cm组0.92±0.66,≤5 cm组0.37±0.27,P<0.05),提示miR-27a的表达与肿瘤大小呈正相关.CCK-8结果显示miR-27a可显著促进肝癌细胞的增殖(0、24、48、72 h的吸光度值分别为:对照组0.54±0.01、0.74±0.04、0.94±0.03、1.23±0.07,miR-27a转染组0.55±0.01、0.71±0.02、1.02±0.08、1.59±0.09,P<0.01).荧光素酶报道载体结果说明miR-27a直接作用于Spry2基因的3非翻译区(miR-27a野生型组抑制率约40%,突变型组约5%).Real-time PCR检测结果说明miR-27a对Spry2基因的mRNA有显著的抑制作用(miR-27a转染组0.0065±0.0005,对照组0.0120±0.001 0,抑制率约47%,P<0.05).结论 miR-27a在肝癌中高表达,可通过抑制抑癌基因Spry2的表达促进肝癌细胞的增殖.