【摘 要】
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为研究葛根素与ERK1/2信号通路的联系以及通过该通路机制对MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨前体细胞)细胞增殖和分化的影响.将各浓度梯度的葛根素作用于MC3T3-E1细胞,用CCK-8法进行该细胞的活力检测,筛选出能够促进MC3T3-E1细胞增殖的最适浓度和最佳作用时间;为判断各浓度梯度葛根素作用于MC3T3-E1细胞的分化程度,使用pNPP法对该细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)进行活性检测.分别设置空白对照组、葛根素组、葛根素+ERK1/2抑制剂组,培养液作用于MC3T3
【机 构】
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甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070
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为研究葛根素与ERK1/2信号通路的联系以及通过该通路机制对MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨前体细胞)细胞增殖和分化的影响.将各浓度梯度的葛根素作用于MC3T3-E1细胞,用CCK-8法进行该细胞的活力检测,筛选出能够促进MC3T3-E1细胞增殖的最适浓度和最佳作用时间;为判断各浓度梯度葛根素作用于MC3T3-E1细胞的分化程度,使用pNPP法对该细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)进行活性检测.分别设置空白对照组、葛根素组、葛根素+ERK1/2抑制剂组,培养液作用于MC3T3-E1细胞,在最适葛根素浓度和最佳作用时间下,用CCK-8、pNPP和ELISA法检测各组细胞增殖能力、ALP活性和Ⅰ型胶原分泌水平.使用Western blot检测p-ERK1/2蛋白表达水平.结果 对比空白对照组,测出各浓度梯度葛根素组作用于MC3T3-E1细胞,能够促进细胞不同程度的增殖和分化,其中浓度为10-6 mol/L葛根素组在培养48 h时促进细胞增殖和分化的作用最为显著.空白对照组与葛根素组相比,10-6 mol/L葛根素组可以显著增强MC3T3-E1细胞增殖、Ⅰ型胶原分泌和细胞ALP活性,当加入ERK1/2信号通路抑制剂(SCH772984)后能够明显抑制MC3T3-E1细胞的增殖、ALP的活性、Ⅰ型胶原蛋白的分泌以及p-ERK1/2蛋白的表达.结果 表明葛根素可以通过激活ERK1/2信号通路增强MC3T3-E1细胞Ⅰ型胶原分泌、细胞ALP活性水平,调控MC3T3-E1细胞的增殖分化程度.
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