探讨miR-29c靶向AKT2对肝癌细胞HepG2放射敏感性的影响。
方法RT-PCR检测人正常肝THLE-3细胞和肝癌HepG2细胞中miR-29c表达。给予不同剂量(0、2、4、6和8 Gy)的X射线照射后，RT-PCR检测HepG2细胞中miR-29c表达变化。经生物信息学预测并采用双荧光素酶报告基因实验和Western blot检测miR-29c与AKT2的靶向关系。采用脂质体2000将miR-29c mimic/AKT2基因重组质粒和miR-29c inhibitor/慢病毒载体AKT2 shRNA转染至HepG2细胞中，并给予不同剂量X射线照射后，克隆形成实验和MTT实验检测miR-29/AKT2对HepG2细胞存活率和细胞活力的影响。
结果与THLE-3细胞相比，HepG2细胞中miR-29c明显降低，差异有统计学意义(t＝17.816，P<0.05)；HepG2经2、4、6和8 Gy X射线照射后，细胞存活率较THLE-3细胞显著降低(t＝4.541、6.823、7.218、9.363，P<0.05)，HepG2细胞中miR-29c表达显著下降(t＝5.599、9.262、10.470、10.873，P<0.05)。miR-29c过表达可降低HepG2细胞存活率和细胞活力(t存活率＝4.307、7.668、7.668、6.894，P<0.05；t细胞活力＝3.443、8.116、13.434，P<0.05)；反之，抑制miR-29c表达则升高HepG2细胞存活率和细胞活力(t＝4.003、6.713、7.141，P<0.05；t细胞活力＝4.282、5.113，P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验表明，AKT2是miR-29c的靶基因，Western blot检测结果显示，miR-29c可负向调控AKT2蛋白表达。沉默AKT2后，HepG2细胞的存活分数及细胞存活率趋势与miR-29c过表达相一致；反之，AKT2过表达则与抑制miR-29c表达相一致。
结论miR-29c可通过靶向AKT2增加肝癌细胞HepG2放射敏感性。