【摘 要】
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在本实验室前期研究的基础上,选取与四环素耐药表型相关性较好的Tet B基因,建立PCR方法,以探索副猪嗜血杆菌耐药性的快速检测方法。本研究利用四环素主要耐药基因Tet B的引物
【机 构】
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浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,南京农业大学动物医学院,安徽农业大学动物科技学院
【基金项目】
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畜禽健康养殖科技创新团队项目(2010R50027)
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在本实验室前期研究的基础上,选取与四环素耐药表型相关性较好的Tet B基因,建立PCR方法,以探索副猪嗜血杆菌耐药性的快速检测方法。本研究利用四环素主要耐药基因Tet B的引物,对PCR反应条件进行优化,以副猪嗜血杆菌基因组DNA为模板,未出现非特异性扩增条带,PCR扩增条带单一。将Tet B基因克隆至p MD 19T载体,以重组质粒为标准品,确定了最低检测拷贝数,经测定,最低检测拷贝数为1.54×10^3。以不同稀释度的21A7菌株基因组DNA为模板,确定了最低细菌检出量,经测定,最低检测细菌
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