原苏木素A通过调控Notch1信号通路增加前列腺癌细胞的放疗敏感性

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目的:研究原苏木素A(PrA)对前列腺癌PC-3细胞放疗敏感性及的Notch1信号通路影响.方法:体外培养人前列腺癌PC-3细胞,分别用不同浓度PrA(100,200,400,800,1 600 μmol·L-1)处理对数生长期PC-3细胞,分别设为PrA-1组、PrA-2组、PrA-4组、PrA-8组、PrA-16组,另设无处理PC-3细胞为正常对照(NC)组,只进行放射处理的PC-3细胞为放射处理(RT)组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组前列腺癌PC-3细胞增殖情况;采用平板克隆试验法检测前列腺癌PC-3细胞增殖能力;采用流式细胞仪和AnnexinV-FITC/PI法体外检测前列腺癌PC-3细胞凋亡率;Western Blot检测前列腺癌PC-3细胞中凋亡相关半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (cleaved-caspase3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平及Notch1信号通路相关蛋白Jagged1、Notch1、Hes-1蛋白表达.结果:与NC组比较,RT组、PrA-1、PrA-2、PrA-4、PrA-8组前列腺癌PC-3细胞增值抑制率呈时间依赖性依次增加(P<0.05),PrA-8组48 h时,前列腺癌PC-3细胞抑制率为51.03%,与半数抑制浓度(IC.)接近,因此将800 μmol·L-1作为PrA最佳浓度,48 h作为最佳作用时间用于下游实验.与NC组比较,RT组、PrA-4、PrA-8组列腺癌PC-3细胞平板克隆形成率、Bcl-2蛋白水平依次降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、cleaved-caspase3、Jagged1、Notch1、Hes-1蛋白水平依次升高(P<0.05).PrA-8和PrA-16组前列腺癌PC-3细胞增值抑制率、克隆形成率、凋亡率、Bcl-2、Bax、cleaved-caspase3、Jagged1、Notch1、Hes-1蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:原苏木素A可通过上调Bax、cleaved-caspase3,下调Bcl-2蛋白,激活Notch1信号通路增加前列腺癌PC-3细胞的放疗敏感性.
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