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目的构建具有天然氮末端的重组鸡半胱氨酸蛋白酶抑制剂（chicken cystatin，cC）在毕赤酵母中高效分泌表达。方法通过设计独特的引物，利用DNA重组技术将cC的cDNA片段插入分泌型酵母表达载体pPICZaA中，构建相应的重组酵母表达质粒pPICZaA—cC，并在巴氏毕赤酵母（Pichia pastoris）菌株X-33中甲醇诱导表达。结果经十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）、底物活性SDS—PAGE和Native—PAGE分析，随着不同剂量的β-巯基乙醇和盐酸胍组合处理重组cC