探讨人参皂甙Rd能否对抗H2O2刺激小胶质细胞引起的氧化应激损伤及对小胶质细胞生物功能的影响。
方法实验分为空白对照组、人参皂甙Rd组、H2O2组、人参皂甙Rd 10 μmol/L+H2O2组、人参皂甙Rd 20 μmol/L+H2O2组。空白对照组为小鼠小胶质细胞系N9细胞在CO2孵箱孵育24 h;人参皂甙Rd组应用20 μmol/L人参皂甙Rd处理N9细胞24 h; H2O2组应用700 μmol/L H2O2处理N9细胞24 h;人参皂甙Rd 10 μmol/L+H2O2组、人参皂甙Rd 20 μmol/L+H2O2组分别应用10 μmol/L、20 μmol/L人参皂甙Rd预处理N9细胞24 h,然后加入700 μmol/L H2O2作用24 h。处理结束后,应用MTT法检测各组细胞活力,应用2' ,7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)水平,应用四甲基罗丹明乙酯(TMRE)检测线粒体膜电位(MMP),应用Western blotting检测脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达水平。
结果与空白对照组、人参皂甙Rd组相比,H2O2组细胞存活率明显下降,ROS水平明显升高,MMP水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,人参皂甙Rd组BDNF蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P< 0.05);与H2O2组相比,人参皂甙Rd 10 μmol/L+ H2O2组、人参皂甙Rd 20 μmol/L+ H2O2组细胞存活率明显升高,ROS水平明显下降,MMP水平明显增高,BDNF蛋白表达水平增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论人参皂甙Rd能够对抗H2O2介导的小胶质细胞氧化应激损伤,且能促进小胶质细胞分泌BDNF,对小胶质细胞有显著的保护作用。