结缔组织生长因子CT结构域的原核表达及分离纯化

来源 :东南大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：qzhair

【摘要】

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目的：构建pET32a-TrxA-His-CTGF-CT原核表达载体，实现重组CTGF-CT的可溶性表达及分离纯化，以用于制备CTGF-CT抗体。方法:基因合成CTGF-CT序列，利用5+和限制性内切酶双酶切后插入p

【作者】

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薛秀蕾范小波吴国球

【机构】

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东南大学医学院,东南大学附属中大医院

【出处】

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东南大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2017年2期

【关键词】

：

结缔组织生长因子原核表达蛋白纯化

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目的：构建pET32a-TrxA-His-CTGF-CT原核表达载体，实现重组CTGF-CT的可溶性表达及分离纯化，以用于制备CTGF-CT抗体。方法:基因合成CTGF-CT序列，利用5+和限制性内切酶双酶切后插入pET32a载体，构建pET32a=rxA-His=TGF=T重组质粒，阳性质粒转化PstrainBL21(DE3)细胞，通过异丙基！D-硫代半乳糖苷（IPTG)诱导获得重组融合蛋白，利用镍柱亲和纯化及肠激酶酶切纯化获得目的蛋白CTGF-CT，SDS-PAGE鉴定蛋白纯度并进行Westernbl

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