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目的改进大鼠肝枯否细胞分离、纯化和培养技术，探讨从人体肝脏手术标本中分离、纯化和培养枯否细胞的可行有效方法。方法32只SD大鼠肝脏及9例人体肝脏手术标本用于本实验。大鼠肝脏经门静脉、人体肝组织通过肝静脉灌注预灌流液，灌注后肝脏标本采用离体胶原酶灌注消化获得细胞悬液，差速离心获得富含KC的肝非实质细胞。改传统PBS重悬肝非实质细胞为25％percoll重悬，形成新percoll梯度由上向下为：PBS、含肝非实质细胞的25％pereoll、50％pereoll，不连续密度梯度离心分离获得枯否细胞，最后选择性贴