【摘 要】
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[目的]研究生淀粉结合域SBD及糖化酶基因在毕赤酵母中的融合表达,提高酶的表达量和水解生淀粉的能力.[方法]利用In-fusionTM PCR克隆技术将淀粉结合域SBD无缝隙插入到黑曲霉
【机 构】
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广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心
【基金项目】
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八桂学者建设工程专项经费和2014年留学人员科技活动项目资助;广西自然科学基金;广西科学研究与技术开发计划项目;国家自然科学基金
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[目的]研究生淀粉结合域SBD及糖化酶基因在毕赤酵母中的融合表达,提高酶的表达量和水解生淀粉的能力.[方法]利用In-fusionTM PCR克隆技术将淀粉结合域SBD无缝隙插入到黑曲霉糖化酶基因glu的5′端构建融合表达质粒pPIC9K-psg,实现融合酶基因psg在毕赤酵母GS115中的高效表达,并进行酶学性质研究.[结果]融合酶的最适作用条件及热稳定性均与原始酶无明显差别,但反应温度及pH值的范围更为宽泛,在反应温度60～70℃,pH值为4.0～7.0时均较稳定;融合酶PSG降解生淀粉的能力较原始酶PG提高29.6％,比原始菌株提高86.5％.[结论]淀粉结合域SBD的融合提高了糖化酶水解生淀粉的能力.
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