【摘 要】
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目的贴壁法分离小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),观察表达EBV LMP2蛋白的小鼠MSCs(MSCs-LMP2)体内诱导特异性CTL应答效果。方法贴壁培养法分离BALB/c小鼠MSCs,流式细胞术鉴定MSCs
【机 构】
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北京工业大学生命与生物工程学院,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室,
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目的贴壁法分离小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),观察表达EBV LMP2蛋白的小鼠MSCs(MSCs-LMP2)体内诱导特异性CTL应答效果。方法贴壁培养法分离BALB/c小鼠MSCs,流式细胞术鉴定MSCs纯度。利用携带EBV LMP2基因的非复制重组5型腺病毒(Ad5-LMP2)感染已鉴定小鼠MSCs,制备表达EBV LMP2蛋白的MSCs-LMP2。使用MSCs-LMP2肌内注射的方式免疫BALB/c小鼠,每次免疫剂量6×105个细胞,免疫间隔为1周,连续免疫5次。末次免疫后1周分离小鼠脾淋巴细胞,Elispot方法检测EBV LMP2特异性CTL应答。结果贴壁培养法分离、纯化的小鼠骨髓MSCs纯度可达91.8%;Ad5-LMP2感染的MSCs能很好表达LMP2蛋白,形成MSCs-LMP2,MSCs-LMP2免疫同种小鼠后,在1×106个小鼠脾淋巴细胞中,诱导产生的LMP2特异性CTL能达到323个。结论贴壁培养法能够获得纯度较高的小鼠骨髓MSCs;LMP2修饰的MSCs(MSCs-LMP2)能诱导同种小鼠产生特异性CTL应答。
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