PE P-1-血红素加氧酶-1融合蛋白预处理对L02肝细胞缺氧复氧损伤的影响

来源 :临床外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:setsail2008
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目的:评价细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1(HO-1)预处理对L02肝细胞缺氧复氧损伤的影响。方法利用基因工程手段表达和纯化融合蛋白PEP-1-HO-1(PEP-1-heme oxy-genase-1,PEP-1-HO-1)。使用人肝细胞株(HL-7702)建立培养人肝细胞缺氧复氧模型。按实验需要以10%新生牛血清的DMEM液静置培养L02肝细胞,将细胞进行随机分为7组:A组,正常对照组(常规培养);B组,缺氧复氧组(缺氧复氧组细胞缺氧18 h,复氧6 h);C组,PEP-1-HO-1预处理组,按PEP-1-HO-1浓度分为5亚组(C1,0.125μmol/L;C2,0.25μmol/L ;C3,0.5μmol/L;C4,1.0μmol/L;C5,2.0μmol/L,缺氧前以PEP-1-HO-1融合蛋白预处理2 h,缺氧18 h,复氧6 h)。复氧结束后,收集各组细胞及培养液上清,检测MDA、LDH、AST、ALT含量及SOD活性。结果缺氧复氧组较正常对照组相比,MDA、LDH、AST及ALT水平明显升高(P<0.05),而 SOD 水平下降(P<0.05);PEP-1-HO-1预处理组与缺氧复氧组相比,预处理组能明显降低MDA、LDH、AST及ALT水平(P<0.05),使得SOD水平上升(P<0.05),且在一定浓度下与剂量呈正相关。结论 PEP-1-HO-1融合蛋白预处理可减轻细胞缺氧复氧损伤。
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