【摘 要】
:
目的制备人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的小鼠单克隆抗体,并应用该抗体检测ASGPR在细胞系和组织中的表达。方法对ASGPR H1大亚基进行序列分析,选取ASGPR1全长序列制备免疫原。
【机 构】
:
苏州大学医学部临床医学院,第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤研究室,
论文部分内容阅读
目的制备人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的小鼠单克隆抗体,并应用该抗体检测ASGPR在细胞系和组织中的表达。方法对ASGPR H1大亚基进行序列分析,选取ASGPR1全长序列制备免疫原。通过RT-PCR合成ASGPR1cDNA,构建ASGPR1表达重组载体,在E.coli BL21中表达后纯化,获得目的抗原。应用传统融合杂交瘤技术制备小鼠单克隆抗体,常规检测单抗亚类和效价,竞争抑制实验鉴定单抗特异性。用流式细胞术和免疫组织化学法分别检测ASGPR在多种肝源性与非肝源性细胞系以及多种肝组织中的表达。结果制备的单克隆抗体亚型为IgG1,效价达112 800。竞争抑制实验结果显示该单抗具有很好的ASGPR结合特异性,而且识别的肽段位于ASGPR胞外段。流式细胞术检测结果显示,ASGPR不同程度地表达于肝源性细胞系,但不表达于非肝源性细胞系。免疫组织化学检测结果显示,ASGPR专一性表达于正常肝组织和肝癌组织,在肝癌组织的表达与分化程度有关,高分化肝癌中的阳性率高于低分化肝癌(75.0%vs 28.6%,P<0.05)。结论成功制备高特异性人ASGPR小鼠单克隆抗体,适用于用流式细胞术和免疫组织化学法检测ASGPR表达,可用于临床病理鉴定原发性肝癌与转移性肝癌。
其他文献
<正>一、用线条感知"变"和"突然变"师:(板书:变变变,突然变)小朋友,黑板上的六个字会读吗?请读一遍。(生齐读课题)师:如果请你用线条、圆圈等符号来表示"变变变,突然变",前面
<正>建筑在演进的过程中需要传承与发扬。西北地坑窑,这种传统建筑形式,饱含地域文化。然而这种极具中国西北地域特色的建筑形式正在逐渐消失。设计者通过自己在地坑窑中的生
现代经济发展中金融的作用在不断增强,经济运行与金融运行融为一体,经济货币化程度不断提高;同时,金融风险也成为影响经济发展的重要因素。对于发展中国家来说,必须从实际出发改革
随着科学技术的发展,测绘技术的不断进步,GPS控制测绘技术在地理信息系统中得到了广泛的应用。GPS即全球定位系统,是在卫星无线电导航定位系统的基础上,由环球通讯卫星和接收
本文利用新疆30个扶贫重点县的3000农户的调查数据,对影响农户参与扶贫活动的因素进行了计量经济分析。分析结果表明:从农户所在社区情况、农户基本特征和具备的能力来看,总
为了研究分析大荔县高氟地下水的成因,本文从水文地质角度对大荔县地下水流场特征及地下水水文地球化学形成作用进行了分析,经过分析表明,大荔县高氟地下水的内在成因主要是在有
目的探讨老年腰椎间盘突出症采取针灸配合艾灸治疗的疗效。方法选取70例于2012年9月~2013年9月我院接收的老年腰椎间盘突出症患者,将其将入选患者按治疗方式的不同分为对照组
很多CIO为解决安全问题而忙得不亦乐乎,甚至焦头烂额,他们忙着东“堵”西“防”,却没有注意到,在系统这枚硬币的另一面,一个“管”字赫然在上。
目的:观察中西医结合治疗糖尿病合并急性坏死性筋膜炎的疗效。方法:将47例该病患者予中医辨证施治,局部治疗、抗菌药物、支持疗法。结果:临床治愈28例,显效9例,有效6例,无效4