结核分枝杆菌休眠菌复苏初期与活跃期的差异表达基因分析

来源 :结核病与胸部肿瘤 | 被引量 : 0次 | 上传用户:honglei413413
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目的 寻找休眠结核分枝杆菌复苏的关键基因,探讨结核分枝杆菌复苏的机制。方法 取7H9培养20天的H37Rv作为对数生长期的活跃结核分枝杆菌,并提取RNA。取一部份对数生长期的H37Rv加入亚甲兰作为无氧标志,37℃密封培养,无氧状态下生长的H37Rv会随着培养基中的氧气耗尽而进入休眠状态,继续无氧培养1个月的陈旧菌即为休眠菌,取休眠菌,加入适量5个复苏因子蛋白质组合,37℃有氧培养三天,提取RNA。用mRNA纯化试剂盒纯化RNA。利用抑制性消减杂交(SSH)技术分析复苏因子蛋白刺激三天的休眠结核分枝杆菌和
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