【摘 要】
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筛选酶抑制剂常需测定米氏常数（Km）和最大反应速度（Vm）来确定抑制常数（Ki）.双倒数分析法测定Ki效率低,且靶酶Km越高则成本越高.积分法和线性动力学法[5,6]测定Ki所需底物浓度都高于
【机 构】
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重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金（编号30472139）和重庆医科大学创新基金（2002CX03）.
论文部分内容阅读
筛选酶抑制剂常需测定米氏常数（Km）和最大反应速度（Vm）来确定抑制常数（Ki）.双倒数分析法测定Ki效率低,且靶酶Km越高则成本越高.积分法和线性动力学法[5,6]测定Ki所需底物浓度都高于Km,至今对高Km靶酶都测定极低底物浓度下的半抑制浓度,或再换算成抑制常数表示抑制效力.但测定低浓度底物下的初速度要求高灵敏度的定量方法.实际上在低浓度底物下用简化积分法也可测定Ki.Bacillus fastidiosus胞外尿酸酶Km接近0.2 mmol/L,黄嘌呤是其竞争性抑制剂.本文用低浓度尿酸,比较测定初速
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