【摘 要】
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目的利用基因工程技术克隆人组织纤溶酶原激活物（t—PA）基因并构建一种能高效、安全表达t—PA的pEGFP—N3-t—PA真核表达重组质粒，为进一步研制转基因动物奠定基础．方法采用高效T
【机 构】
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山东师范大学生命科学学院动物抗性生物学重点实验室
【基金项目】
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山东省优秀中青年科学家科研奖励基金资助项目(2004BS01012)
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目的利用基因工程技术克隆人组织纤溶酶原激活物（t—PA）基因并构建一种能高效、安全表达t—PA的pEGFP—N3-t—PA真核表达重组质粒，为进一步研制转基因动物奠定基础．方法采用高效Trizol试剂快速从黑色素瘤细胞中提取总RNA，RT—PCR获得t—PAcDNA，并将真核表达质粒pEGFP—N3和t—PA基因片段分别双酶切，将回收的pEGFP—N3大片段（4．7kb）与t—PA基因片段（1．1kb）重组．对pEGFP—N3-t—PA质粒进行酶切鉴定和基因测序鉴定．脂质体介导pEGFP—N3-t—PA转
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