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目的
探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的可能性。
方法密度梯度法分离培养兔BMSCs,取BMSCs(P3)。实验组:含TGF-β1的诱导培养基,对照组:不含TGF-β1诱导培养基,体外培养两周。阿尔新蓝法(Alcian blue)检测培养基内葡糖胺聚糖(GAG)含量。培养第14天,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测髓核样细胞Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及聚集蛋白多糖(Aggrecan) mRNA基因表达。免疫组织化学法测定CollagenⅡ的含量变化。
结果GAG检测结果显示,第7、10、13天实验组GAG含量均显著高于对照组(P< 0.01)。实验组CollagenⅡ免疫组织化学染色阳性,表达量较对照组高。Real-time PCR结果证实:实验组CollagenⅡ和Aggrecan mRNA表达水平较对照组显著增高(P< 0.01)。
结论TGF-β1能明显增加BMSCs向髓核样细胞分化的诱导生物活性,促进BMSCs向髓核样细胞定向分化。