新生鼠输尿管部分梗阻肾脏差异蛋白质的筛选和鉴定

来源 :中华小儿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:BEYONDPEAKER
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目的

筛选新生鼠输尿管部分梗阻(partial unilateral ureteral obstruction,PUUO)后不同时间点肾脏的差异蛋白质,并检测差异蛋白PRDX1在新生鼠肾脏及先天性肾积水患儿尿液中的表达。

方法

应用双向电泳及质谱分析技术,检测SD新生鼠PUUO后1 d、2 d、5 d以及正常对照组肾脏组织差异蛋白质的表达。应用Western blot方法检测筛查出的差异蛋白质PRDX1在PUUO组和正常对照组新生鼠肾脏组织中的表达,应用Elisa方法检测PRDX1在20例先天性肾积水患儿及20例正常对照组患儿尿液中的表达。

结果

46个表达量相差2倍以上的差异蛋白质点,经质谱分析和蛋白质数据库检索成功鉴定出43个蛋白质,涉及肌动蛋白的调节、能量代谢及线粒体损伤、氧化应激及内质网应激等方面。新生鼠肾脏组织中PRDX1蛋白在PUUO1d组为0.836 1±0.017,与正常对照组相比高表达,在PUUO 2 d和5 d组分别为0.541 9±0.035和0.548 8±0.021,与正常对照组相比无明显差异。PRDX1/cr.在先天性肾积水患儿的尿液中为0.119±0.056,与对照组相比明显上调,术后1个月的尿液中PRDX1/cr.的表达为0.072±0.034,与术前相比明显下降,与正常对照组相比无明显差异。

结论

运用双向电泳技术结合质谱分析及生物功能信息分析筛选并鉴定出43个在PUUO新生鼠肾脏中差异表达的蛋白质,这些蛋白质可能与梗阻性肾病的发生、发展有关。其中PRDX1可能在梗阻性肾病的发生、发展过程中发挥重要的作用。

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