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筛选新生鼠输尿管部分梗阻(partial unilateral ureteral obstruction,PUUO)后不同时间点肾脏的差异蛋白质,并检测差异蛋白PRDX1在新生鼠肾脏及先天性肾积水患儿尿液中的表达。
方法应用双向电泳及质谱分析技术,检测SD新生鼠PUUO后1 d、2 d、5 d以及正常对照组肾脏组织差异蛋白质的表达。应用Western blot方法检测筛查出的差异蛋白质PRDX1在PUUO组和正常对照组新生鼠肾脏组织中的表达,应用Elisa方法检测PRDX1在20例先天性肾积水患儿及20例正常对照组患儿尿液中的表达。
结果46个表达量相差2倍以上的差异蛋白质点,经质谱分析和蛋白质数据库检索成功鉴定出43个蛋白质,涉及肌动蛋白的调节、能量代谢及线粒体损伤、氧化应激及内质网应激等方面。新生鼠肾脏组织中PRDX1蛋白在PUUO1d组为0.836 1±0.017,与正常对照组相比高表达,在PUUO 2 d和5 d组分别为0.541 9±0.035和0.548 8±0.021,与正常对照组相比无明显差异。PRDX1/cr.在先天性肾积水患儿的尿液中为0.119±0.056,与对照组相比明显上调,术后1个月的尿液中PRDX1/cr.的表达为0.072±0.034,与术前相比明显下降,与正常对照组相比无明显差异。
结论运用双向电泳技术结合质谱分析及生物功能信息分析筛选并鉴定出43个在PUUO新生鼠肾脏中差异表达的蛋白质,这些蛋白质可能与梗阻性肾病的发生、发展有关。其中PRDX1可能在梗阻性肾病的发生、发展过程中发挥重要的作用。