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目的
观察抑制气管移植物核因子-κB(NF-κB)蛋白表达对同种异体气管移植急性排斥反应的影响。
方法取50只BALB/c和C57BL/6小鼠分为3组:同基因移植组(A组)、脂质体对照组(B组)和小干扰RNA(siRNA)干扰组(C组)。体外建立siRNA干扰NF-κB蛋白低表达支气管移植物以及气管移植动物模型,最后比较各组移植后第7、14和28天排斥反应的程度。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测NF-κB基因和蛋白的表达水平,苏木素-伊红(HE)染色检测炎性细胞浸润、气管通畅度和上皮细胞存活率。
结果与A组比较,气管移植后第14天,B组支气管大量炎性细胞浸润,管腔出现纤维阻塞,通畅度为(62.0±16.7)%,支气管上皮细胞存活率为(11.0±24.6)%;而C组少量炎性细胞浸润,支气管管腔通畅度为100%(P< 0.05),C组支气管上皮细胞存活率为(78.80±4.41)%(P< 0.05);气管移植后第21天,B、C两组管腔通畅度及上皮细胞存活率均为0。
结论siRNA沉默支气管上皮细胞NF-κB蛋白表达可通过抑制急性排斥反应的水平,延长气管管腔的通畅时间和上皮细胞存活时间,从而延缓闭塞性细支气管炎的发展。