【摘 要】
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目的 构建与海肾荧光素酶(Rluc)融合的人Neurotensin-R1(HumanNeurotensinreceptorl,NTS1 or NTSR1)真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法检测人NTS与其它受体间的相互作用以及研究Neurotensin—R介导的细胞内信号转导机制。方法以质粒peDNA3.1-hNTS1为模板,PCR方法扩增人NTS。扩增的人NTS以及质粒pRluc—pcDN
【机 构】
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济宁医学院神经生物研究所,济宁272067,济宁医学院神经生物研究所,济宁272067,济宁医学院神经生物研究所,济宁272067
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目的 构建与海肾荧光素酶(Rluc)融合的人Neurotensin-R1(HumanNeurotensinreceptorl,NTS1 or NTSR1)真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法检测人NTS与其它受体间的相互作用以及研究Neurotensin—R介导的细胞内信号转导机制。方法以质粒peDNA3.1-hNTS1为模板,PCR方法扩增人NTS。扩增的人NTS以及质粒pRluc—pcDNA3.1用NotI和XbaI双酶切,然后将这2种酶切产物按常规方法连接、转化至大肠杆菌Top10中,该菌在培养箱中孵育12~16h后,挑取菌落培养,提取质粒,进行酶切鉴定,最后进行测序。将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(humanembryonickidney293,HEK293)细胞。最后,通过共聚焦显微镜观察经过免疫荧光染色的细胞以及Westernblot鉴定人Neu—rotensinl—R的表达。结果通过PCR扩增出一条1257bp的基因片段,序列与GenBank(NM-002531)相同。Westernblot中大约90kDa处有一蛋白条带,与预期大小相同。人Neurotensin—R表达在细胞膜上。结论成功构建了pRluc—hNeurotensinl—R重组表达载体,建立了该质粒转染HEK293的细胞模型。可被用于检测与其它受体间的相互作用以及研究Neurotensinl—R介导的细胞内信号转导机制,这将有助于探究疾病的发病机制及开发新的药物靶点。
其他文献
目的 了解急进高原抗震救灾官兵的急性高原反应状况,并探讨其心理行为相关影响因素,为进一步研究预防措施提供参考依据。方法整群随机抽取玉树抗震救灾某部162名官兵为研究对象,根据军标GJB1098—9急性高原反应的诊断和处理原则判断官兵的急性高原反应状况,采用一般情况调查表、症状自评量表(SCL-90)和生活事件量表(LES)调查相关因素。结果救灾官兵急性高原反应的检出率为65.4%,其中轻度17.3
第12届国际行为医学大会定于2012年8月29日至9月1日在匈牙利首都布达佩斯(the 12th International Congress of Behavioral Medicine to be held in Budapest,Hungary,between29August—1 September,2012)召开。为加强国际交流,促进我国行为医学与国际行为医学的交流与合作,中华医学会行为医
目的 研究急性一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)患者血清S100B蛋白、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平的动态变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法动态测定33例DEACMP患者血清S100B蛋白、GFAP水平,用日常生活能力量表(ADL)、常识-记忆-注意测验(IMCT)、长谷川痴呆量表(HDS)动态检查DEACMP患者病情变化,并与32例急性一氧化碳(CO)中毒后未发生迟发性脑病患者进
《压力(应激)系统模型——解凄婚姻》(浙江大学出版社,2011)反映姜乾金教授近30年压力(应激)研究的成果及在婚姻家庭问题中的应用。上篇介绍一种本土化的婚恋家庭理念,并指导处理各种婚恋家庭问题,下篇介绍自主创新的压力系统模型的理论、方法、应用及相关评估工具,值得苦恼于婚恋家庭问题的人士和临床工作者参考。定价35元,邮购电话0571—88925591,网络亦有售。
广西行为医学专业委员会于2011年11月25日下午,在广西医科大学综合楼学术报告厅召开2011年度工作会议暨学术报告会。中华医学会行为医学分会主任委员、济宁医学院副院长杨志寅教授,人民卫生出版社主任编审、《行为医学理论与应用丛书》编委会执行主编潘丽出席了本次会议。广西行为医学专业委员会全体委员及来自广西各地的教育、卫生界以及其他领域的本专业代表共150余人出席了本次大会。
为促进行为医学学科进步与发展,促进行为医学学术交流,由中华医学会行为医学分会主办的“第十一次全国行为医学学术会议”于2009年11月19~22日在广州市隆重召开。全国人大常务委员会委员、中华预防医学会会长、国家卫生部原副部长王陇德教授,中华医学会会长、中国工程院院士钟南山教授到会祝贺并发表了重要讲话。
为提高我国行为医学的临床和科研水平,打造行为医学学术交流平台,2011年8月12—15日中华医学会第十三次全国行为医学学术会议在宁夏同族自治区银川市隆重召开,会议主题为“行为医学与疾病防治、健康促进”。本次会议由中华医学会行为医学分会主办,宁夏医科大学、宁夏医学会行为医学分会筹备委员会、宁夏心理卫生协会承办。宁夏回族自治区卫生厅副厅长崔学光,
由中华医学会行为医学分会常委、广西行为医学专业委员会副主任委员、广西医科大学王翔南教授撰写的《心理医生的秘密一心理咨询特案集锦》一书,已由人民卫生出版社出版发行。
为促进行为医学学科进步与发展,促进行为医学学术交流,由中华医学会行为医学分会主办的“第十一次全国行为医学学术会议”于2009年11月19~22日在广州市隆重召开。全国人大常务委员会委员、中华预防医学会会长、国家卫生部原副部长王陇德教授,
行为决定健康,这不仅仅是一个战略,重要的是给人类健康提供了一个指导思想。这在慢性非传染性疾病的防治中显得尤为重要,近几十年来,随着人们生活水平的提高和伴随增多的不良生活行为方式,导致慢病(心脑血管病、2型糖尿病、肥胖、代谢综合征及肿瘤等)有增无减的事实,正在向人类行为与健康发出严重警告!心理健康是健康的灵魂,行为健康是健康的基石。告诫世人这一健康理念之价值是何等的重要。行为决定健康之思想,正是大众