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目的 探讨舌黏膜细胞的培养方法,为进一步以舌黏膜细胞作为种子细胞构建组织工程化角膜上皮提供实验依据.方法 体外切取舌侧面和底面黏膜组织,经0.25%Dispase分离上皮层后,再经0.05%的胰酶分离为单个细胞,接种在无血清角质细胞培养液(KSFM)中,进行体外培养,并对其形态学以及生长曲线、传代特点、各代生长特点进行观察.同时,对体外培养获得的舌黏膜细胞进行广谱角蛋白免疫荧光鉴定.结果 舌黏膜细胞能够在无血清角质细胞培养液中稳定生长,呈现典型的"铺路石"状,细胞形态单一,可传至3～4代.细胞免疫荧光显示,体外培养获得的舌黏膜细胞AE1/AE3免疫荧光染色阳性.结论 应用无血清角质细胞培养液,可在短期内获得大量具有增殖能力的舌黏膜细胞,为进一步将其作为种子细胞构建组织工程化角膜上皮奠定了良好的基础。