极端嗜热古菌--芝田硫化叶菌DNA解旋酶的分离纯化和性质研究

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【摘要】

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采用Q Sepharose离子交换层析、磷酸纤维素P11吸附层析、肝素琼脂糖吸附层析、Superdex 200凝胶过滤和Phenyl Superose疏水层析等步骤,从嗜酸热芝田硫化叶菌细胞裂解液中分离

【作者】

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李晻郝福英黄力

【机构】

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北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系,中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

：

2001年3期

【关键词】

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极端嗜热古菌芝田硫化叶菌 DNA解旋酶

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采用Q Sepharose离子交换层析、磷酸纤维素P11吸附层析、肝素琼脂糖吸附层析、Superdex 200凝胶过滤和Phenyl Superose疏水层析等步骤,从嗜酸热芝田硫化叶菌细胞裂解液中分离纯化了一个DNA解旋酶.该解旋酶具有受DNA激活的ATP酶活性.根据SDS-PAGE测定结果,该酶的分子质量约为63kD.芝田硫化叶菌DNA解旋酶可以解开底物上70bp的双链区,其解旋活性依赖于双链区旁的单链分叉.该解旋酶的活性依赖于Mg2+和ATP的水解,在NaCl浓度超过200mmol/L时受到抑制.该

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